申请日2018.03.27
公开(公告)日2018.09.07
IPC分类号C12N1/20; C12N1/14; C02F3/34; C12R1/07; C12R1/10; C12R1/69
摘要
本发明公开了一种复合型微生物制剂，是由短小芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、米曲霉菌和解淀粉芽孢杆菌组成，按照重量份数计，短小芽孢杆菌为40‑50份，地衣芽孢杆菌为40‑50份，米曲霉菌为1‑10份，解淀粉芽孢杆菌为1‑10份。本发明还公开了所述复合型微生物制剂的制备方法及其在污水处理中的应用。本发明的复合型微生物制剂的制备方法简单，该复合型微生物制剂能够显著降低污水中COD的浓度，并能够降低污水中总氮浓度与总磷浓度，能够多次连续地利用，降低污水处理的成本。
权利要求书
1.一种复合型微生物制剂，其特征在于，是由短小芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、米曲霉菌和解淀粉芽孢杆菌组成，按照重量份数计，短小芽孢杆菌为40-50份，地衣芽孢杆菌为40-50份，米曲霉菌为1-10份，解淀粉芽孢杆菌为1-10份;
所述短小芽孢杆菌选自保藏编号为CGMCC NO.1271的菌种，该菌种命名为：Bacilluspumilus，保藏日期为1959年1月1日，保藏单位为：中国科学院微生物研究所，保藏地址为：中国.北京.北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101;
所述地衣芽孢杆菌选自保藏编号为CGMCC NO.1430的菌种，该菌种命名为：Bacilluslicheniformis，保藏日期为1970年12月7日，保藏单位为：中国科学院微生物研究所，保藏地址为：中国.北京.北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101;
所述米曲霉菌选自保藏编号为CGMCC NO.3407的菌种，该菌种命名为Aspergillusoryzae，保藏日期为1952年1月1日，保藏单位为：中国科学院微生物研究所，保藏地址为：中国.北京.北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101;
所述解淀粉芽孢杆菌选自保藏编号为CGMCC NO.11099的菌种，该菌种命名为Bacillusamyloliquefaciens，保藏日期为1979年10月1日，保藏单位为：中国科学院微生物研究所，保藏地址为：中国.北京.北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101。
2.一种复合型微生物制剂的制备方法，其特征在于，该方法用于制备权利要求1所述的复合型微生物制剂，包括以下步骤：
(1)将斜面保存的短小芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌，分别用接种环刮取1环菌苔，接种至液体培养基a进行培养，培养温度为37℃，培养1-2天;
(2)将斜面保存的米曲霉菌，用接种环刮取1环菌苔，接种至液体培养基b进行培养，培养温度为28℃，培养1-2天;
(3)将步骤(1)与(2)得到的各菌株培养液分别在6000～8000r/min下离心10～20min，然后用无菌水洗涤，过滤，分别收集;
(4)将步骤(3)收集的菌体于-20℃冷冻10-12h，然后在-50～-60℃冷冻干燥12-30h;
(5)称取步骤(4)干燥得到的菌体，按照重量份数计，短小芽孢杆菌为40-50份，地衣芽孢杆菌为40-50份，米曲霉菌为1-10份，解淀粉芽孢杆菌为1-10份，混合，制得复合型微生物制剂。
3.根据权利要求2所述的复合型微生物制剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述液体培养基a由以下成分组成：牛肉膏3份、蛋白胨10份、氯化钠5份、水1000份，以上为重量份数;调节pH为7.4～7.6。
4.根据权利要求2所述的复合型微生物制剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的液体培养基b由以下成分组成：磷酸二氢钾1份、硫酸镁0.5份、蛋白胨5份、葡萄糖10份、水1000份、1%孟加拉红水溶液3.5-4份，以上为重量份数;调节pH为7.4～7.6。
5.权利要求1所述的复合型微生物制剂在污水处理中的应用。
6.根据权利要求2-4中任一项所述的制备方法所制得的复合型微生物制剂在污水处理中的应用。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，应用方法为：将权利要求1 所述的复合型微生物制剂，用无菌水配制成2g复合型微生物制剂/L的菌悬液，将该菌悬液投放进污水中，加入该菌悬液的体积为污水体积的1%，混匀，处理7天，每天同一时间进行测定污水中总氮、总磷和COD的浓度。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，应用方法为：将权利要求2-4中任一项的制备方法所制得的复合型微生物制剂，用无菌水配制成2g复合型微生物制剂/L的菌悬液，将该菌悬液投放进污水中，加入该菌悬液的体积为污水体积的1%，混匀，处理7天，每天同一时间进行测定污水中总氮、总磷和COD的浓度。
说明书
一种复合型微生物制剂、制备方法及其在污水处理中的应用
技术领域
本发明涉及一种复合型微生物制剂、制备方法及其在污水处理中的应用。
背景技术
随着世界人口的逐年增多，生活污水的排放量越来越大，而生活污水的随意排放会导致一系列的危害，比如病原物污染、需氧有机物污染、富营养化污染、恶臭、酸碱盐污染、地下水硬度升高等。因此，如何处理生活污水是目前不容忽视的问题。
目前，生活污水的处理方式基本上是通过地下管道集中排放到污水处理厂进行处理，但污水处理厂的建设和运行不但耗资巨大，而且活性污泥法处理生活污水效率不高。
微生物制剂是为了达到污水中污染物质降解的目的，进行遴选、培养、组合针对污水具有特别降解能力的微生物菌形成菌群，成为专门的污水处理菌种，这是目前污水处理技术中最先进的几种方式之一。微生物处理技术在污水处理方面独树一帜，成本低、净化彻底、环保无污染以及操作简单，微生物制剂是利用微生物自身的新陈代谢来达到净化污水的目的，污水中的大量有机物能为微生物的生长繁殖所利用。
通常微生物制剂在投放后没有能够及时形成良好的生长体系，因此在污水处理一段时间后，处理效果降低，需要补充新的微生物制剂。
发明内容
本发明为了克服现有技术的不足，提供一种复合型微生物制剂、制备方法及其在污水处理中的应用。该复合型微生物制剂能够显著降低污水中COD的浓度，并能够降低污水中总氮浓度与总磷浓度，能够多次连续地利用，降低污水处理的成本。
为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种复合型微生物制剂，其特征在于，是由短小芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、米曲霉菌和解淀粉芽孢杆菌组成，按照重量份数计，短小芽孢杆菌为40-50份，地衣芽孢杆菌为40-50份，米曲霉菌为1-10份，解淀粉芽孢杆菌为1-10份;
所述短小芽孢杆菌选自保藏编号为CGMCC NO.1271的菌种，该菌种命名为：Bacillus pumilus，保藏日期为1959年1月1日，保藏单位为：中国科学院微生物研究所，保藏地址为：中国.北京.北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101;
所述地衣芽孢杆菌选自保藏编号为CGMCC NO.1430的菌种，该菌种命名为：Bacillus licheniformis，保藏日期为1970年12月7日，保藏单位为：中国科学院微生物研究所，保藏地址为：中国.北京.北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101;
所述米曲霉菌选自保藏编号为CGMCC NO.3407的菌种，该菌种命名为Aspergillusoryzae，保藏日期为1952年1月1日，保藏单位为：中国科学院微生物研究所，保藏地址为：中国.北京.北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101;
所述解淀粉芽孢杆菌选自保藏编号为CGMCC NO.11099的菌种，该菌种命名为Bacillus amyloliquefaciens，保藏日期为1979年10月1日，保藏单位为：中国科学院微生物研究所，保藏地址为：中国.北京.北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101。
本发明还公开了所述复合型微生物制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)将斜面保存的短小芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌，分别用接种环刮取1环菌苔，接种至液体培养基a进行培养，培养温度为37℃，培养1-2天;
(2)将斜面保存的米曲霉菌，用接种环刮取1环菌苔，接种至液体培养基b进行培养，培养温度为28℃，培养1-2天;
(3)将步骤(1)与(2)得到的各菌株培养液分别在6000～8000r/min下离心10～20min，然后用无菌水洗涤，过滤，分别收集;
(4)将步骤(3)收集的菌体于-20℃冷冻10-12h，然后在-50～-60℃冷冻干燥12-30h;
(5)称取步骤(4)干燥得到的菌体，按照重量份数计，短小芽孢杆菌为40-50份，地衣芽孢杆菌为40-50份，米曲霉菌为1-10份，解淀粉芽孢杆菌为1-10份，混合，制得复合型微生物制剂;
步骤(1)中所述液体培养基a由以下成分组成：牛肉膏3份、蛋白胨10份、氯化钠5份、水1000份，以上为重量份数;调节pH为7.4～7.6。
步骤(2)中所述的液体培养基b由以下成分组成：磷酸二氢钾1份、硫酸镁0.5份、蛋白胨5份、葡萄糖10份、水1000份、1%孟加拉红水溶液3.5-4份，以上为重量份数;调节pH为7.4～7.6。
本发明还公开了所述的复合型微生物制剂在污水处理中的应用。具体应用方法为：将本发明制得的复合型微生物制剂，用无菌水配制成2g复合型微生物制剂/L的菌悬液，将该菌悬液投放进污水中，加入该菌悬液的体积为污水体积的1%，混匀，处理7天，每天同一时间进行测定污水中总氮、总磷和COD的浓度。
本发明的复合型微生物制剂的制备方法简单，该复合型微生物制剂能够显著降低污水中COD的浓度，并能够降低污水中总氮浓度与总磷浓度，能够多次连续地利用，降低污水处理的成本。
