申请日2012.06.14
公开(公告)日2012.10.17
IPC分类号C02F101/38; C02F3/34
摘要
本发明涉及一种降解废水中硝基苯的方法。采用的技术方案是：按1%-20%的体积百分比，将对数生长期的硝基苯耐低温菌接种于含有硝基苯的废水中，调节pH=4～9、震荡下培养48小时。所述的硝基苯耐低温菌是鲍曼不动杆菌。优选的鲍曼不动杆菌为鲍曼不动杆菌株cc-2。采用本发明的方法可在低温环境中有效降解硝基苯，弥补了低温抑制菌株生长代谢和硝基苯降解能力的不足之处，提高了低温环境下菌株对硝基苯的降解能力，为低温环境中硝基苯的治理提供技术支撑。
权利要求书
1.一种降解废水中硝基苯的方法，其特征在于方法如下：按1%-20%的体积百分比，将对数生长期的硝基苯耐低温菌液接种于废水中，调节pH=4～9，震荡下培养48小时。
2.按照权利要求1所述的降解废水中硝基苯的方法，其特征在于：所述的硝基苯耐低温菌是鲍曼不动杆菌。
3.按照权利要求2所述的降解废水中硝基苯的方法，其特征在于：所述的鲍曼不动杆菌为鲍曼不动杆菌株cc-2。
4.按照权利要求1、2或3所述的降解废水中硝基苯的方法，其特征在于：调节废水浓度，使硝基苯的初始浓度为50-200mg/L。
说明书
一种降解废水中硝基苯的方法
技术领域
本发明属于环保领域，特别涉及一种采用鲍曼不动杆菌菌株cc-2降解废水中硝基苯的方法。
背景技术
硝基苯是一种无色或微黄色具苦杏仁味的高毒物质，难溶于水、易溶于乙醇、乙醚、苯和油，而且难生物降解，已被列为世界“环境优先控制有毒有机污染物”。它是一种重要的化工原料，广泛应用于医药、农药、合成染料、染料、塑料以及炸药的生产中。全球化工行业的快速发展使硝基苯的需求量不断增加，由此进入环境的相关污染物也随之增多，含硝基苯废水的大量排放已对环境安全造成了严重威胁。我国要求工业排水中硝基苯类物质的质量浓度≤2mg/L，而饮用水标准则为0.17mg/L，因此关于硝基苯污染水体修复方面的研究备受人们关注。
目前，硝基苯的处理技术主要有物理法、化学法和生物法，生物法具有无二次污染、费用低等优点，是废水中硝基苯降解的理想方法，而生物法主要集中在降解菌株的筛选、应用。
随着对硝基苯降解研究的不断发展，已分离出大量的硝基苯降解菌，包括Bacillus subilis、Streptomyces albidoflavus、Comamonas sp.、Acinetobacter sp.、Pseudomonas pseudoalkaligenes、Rhodotorula mucilaginosa等。但以上大部分降解菌是在常温下进行降解，低温条件下的研究却很少见，在我国北方地区，冬季微生物降解硝基苯所处的环境温度很低，大部分微生物的新陈代谢处于抑制状态，降解硝基苯的能力也受到限制。
发明内容
本发明的目的是为了解决低温环境下细菌对硝基苯的代谢能力差问题，使硝基苯在低温环境中能够得到较好的降解，基于此目的本发明提供一种可在低温条件下具有高效降解硝基苯的方法。
本发明采用的技术方案是：一种降解废水中硝基苯的方法，方法如下：按1%-20%的体积百分比，将对数生长期的硝基苯耐低温菌接种于含有硝基苯的废水中，调节pH=4～9、震荡下培养48小时。
所述的硝基苯耐低温菌是鲍曼不动杆菌。优选的为鲍曼不动杆菌株cc-2。
上述的降解废水中硝基苯的方法，优选的，首先调节废水浓度，使硝基苯的初始浓度为50-200mg/L。
本发明中，鲍曼不动杆菌菌株cc-2的获得：为使菌株在低温条件下具有较好的硝基苯降解能力，对菌株进行低温驯化。步骤如下：(1)将受硝基苯污染的活性污泥于温度28℃、150r/min条件下富集培养48h后得富集液，将上清液梯度稀释后涂布于牛肉膏蛋白胨固体培养基上，观察菌落生长情况。(2)将富集菌液接种于含有硝基苯饱和溶液的无机盐培养基(无机盐培养基主要配方为：磷酸氢二钾3.8g、磷酸二氢钾1g、氯化钠 1g、氯化铵 0.1g、硫酸镁 0.2g、葡萄糖2g，用蒸馏水配成1000ml)中进行菌株的耐硝基苯能力驯化，培养48h后将菌液转到新鲜的液体无机盐培养基中，驯化过程中逐步提高硝基苯浓度，从10mg/L逐步提高到200mg/L。(3)将菌液进行逐步低温驯化，逐步低温驯化是在25℃的条件下培养48h，驯化后取菌液转移，在20℃的条件下培养48h，驯化后转移，在18℃的条件下培养48h，驯化后转移，在15℃的条件下培养48h，驯化后转移。在12℃的条件下培养48h，驯化后转移，在10℃的条件下培养48h，驯化后转移。(4)将菌液梯度稀释后涂布，得到低温条件下的耐硝基苯菌株，进行菌株纯化，得到对硝基苯具有降解能力的硝基苯耐低温菌，即鲍曼不动杆菌，定义为鲍曼不动杆菌株cc-2，结果见图1。
本发明中，低温条件下去除硝基苯的菌株cc-2为鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)，属于不动杆菌属(Acinetobacter sp.)。该菌株为革兰氏阴性好氧菌、短杆状，在牛肉膏蛋白胨固体培养基上形成乳白色菌落，菌落呈圆形，表面光滑。
本发明中的硝基苯耐低温菌株cc-2为革兰氏染色阴性、甲基红试验阴性、伏普试验阴性、水解淀粉、柠檬酸盐试验阳性、过氧化氢试验阳性、不液化明胶、产生吲哚。
本发明中筛选驯化所得的硝基苯耐低温菌菌株cc-2可在15℃的低温条件下有效降解硝基苯，当硝基苯初始浓度为200mg/L时，降解率达到60%以上。
本发明中筛选驯化所得的硝基苯耐低温菌株对硝基苯具有较强的适应能力，可在硝基苯质量浓度低于400mg/L的无机盐培养基中生长代谢。
本发明具有如下优点：
1. 经济环保，现有物理、化学修复硝基苯类化合物污染水体的技术方法，可导致二次污染，危害生态系统且成本较高。而本发明采用生物修复技术其耗资小，不会造成二次污染，具有良好的社会、经济和生态效益。
2. 本发明的菌株是通过较高浓度的硝基苯驯化、筛选而来，具有较强的生长、繁殖及耐硝基苯适应能力，能保证在环境中有较高的生物量。
3. 本发明的菌株是通过低温条件驯化、筛选得到，可在较低温度条件下生长代谢，且能较好的降解硝基苯，保证了在低温环境中硝基苯的降解率。
