申请日2011.12.14
公开(公告)日2012.05.09
IPC分类号C12N1/20; C12N1/02; C02F101/16; C02F3/02; C12R1/01; C02F3/34
摘要
本发明公开了一种低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌株及分离培养方法，低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌株(Perlucidibaca piscinae)硝透CGMCC No.5281，其具有在低温好氧条件下去除污水中亚硝酸盐氮的能力。实验结果表明：尽管受到低温环境的明显抑制，投加本发明的一种低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌株(Perlucidibaca piscinae)硝透CGMCC No.5281，在低温下，特别是在8-12℃的条件下，对污水中亚硝酸盐去除有明显的强化作用，接种本发明的菌株与未接种菌的污水进行比较，亚硝酸盐去除率提高了约为10%。
权利要求书
1.一种低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌株(Perlucidibaca piscinae)硝透CGMCC No.5281，其具有在低温好氧条件下去除污水中亚硝酸盐氮的能力。
2.权利要求1的一种低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌株(Perlucidibaca piscinae)硝 透CGMCC No.5281在低温好氧条件下去除污水中亚硝酸盐氮的用途。
3.根据权利要求2所述的用途，其特征是所述低温为8-12℃。
4.低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌株的分离培养方法，其特征是包括如下步骤：
(1)将10～20mL污水处理厂曝气池污泥接种至装有250mL硝酸细菌培养液的锥形瓶中， 所述硝酸细菌培养液中的亚硝酸钠中氮浓度为50mg/L，在8～12℃，摇床转速为120～140rpm 摇床中驯化，待亚硝酸盐氮降解率达到80～90%时，静置，去除上清液，将锥形瓶底部的污 泥接种至装有250mL第二种硝酸细菌培养液中，所述第二种硝酸细菌培养液中的亚硝酸盐氮 浓度为150mg/L，在8～12℃，在转速为120～140rpm的摇床中驯化，待亚硝酸盐氮降解率 达到80～90%时，即得到含有耐低温细菌的硝酸细菌培养液;
(2)取10mL步骤(1)获得的培养液，加入已装有90mL灭菌蒸馏水和20～30粒灭菌玻 璃珠的250mL锥形瓶中，振荡10～30min，使细菌细胞充分释放到上清液中;静置20～40min， 取1mL上清液加入装有9mL无菌蒸馏水的试管中，得到10-2的菌悬液，按上述方法依次做 系列稀释，一直做到10-8为止;
(3)选取梯度为10-5～10-8的菌悬液，分别取1mL接种于硝酸细菌固体培养基，每个稀释度 做3个平行样，编号;10℃在有氧的条件下保湿培养2～3周;
(4)从步骤(3)中的硝酸细菌固体培养基平板中挑选菌落大，形态不同的单菌落，在硝酸 细菌固体培养基平板中再次划线分离，重复平板划线分离3-4次，使平板上的菌落在显微镜 中的形态相同，单一，大小相似即为单菌落，命名为硝透，经鉴定为低温条件下去除污水中 亚硝酸盐氮的菌株(Perlucidibaca piscinae)。
5.根据权利要求4所述的一种低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌株的分离培养方法， 其特征是所述硝酸细菌培养液由下述组分组成：NaNO2 0.25g、乙酸钠2g、MgSO47H2O 0.05g、K2HPO4 0.2g、NaCl 0.12g、MnSO44H2O 0.01g、FeSO4 0.01g、加蒸馏水至1000m L。
6.根据权利要求4所述的一种低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌株的分离培养方法，其 特征是所述第二种硝酸细菌培养液由下述组分组成：NaNO2 0.74g、乙酸钠2g、MgSO47H2O 0.05g、K2HPO4 0.2g、NaCl 0.12g、MnSO44H2O 0.01g、FeSO4 0.01g、加蒸馏水至1000m L。
7.根据权利要求4所述的一种低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌株的分离培养方法，其 特征是所述硝酸细菌固体培养基由下述组分组成：NaNO2 0.5g、乙酸钠2g、MgSO47H2O 0.05g、K2HPO4 0.2g、NaCl 0.12g、MnSO44H2O 0.01g、FeSO4 0.01g、琼脂20g、加蒸馏 水至1000mL。
说明书
低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌株及分离培养方法
技术领域
本发明涉及一株去除污水中亚硝酸盐氮的菌及其用途。
背景技术
低温对生物处理能力产生重大影响的原因是由于温度的降低影响了微生物的生长及代谢 并使污水处理系统中微生物群系发生了改变。在温度下降过程中，中温菌的代谢活性逐渐下 降，到一定温度时便失去活性，而适于低温环境的低温微生物的数量由于自身的生理特性及 各种生态因子的抑制作用，在数量上无法达到优势菌群的地位，从而导致污水处理厂冬季出 水水质下降。因此亟需一种能在低温好氧条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌株。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌 株(Perlucidibaca piscinae)硝透。
本发明的第二个目的是提供一种低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌株 (Perlucidibaca piscinae)硝透在低温好氧条件下去除污水中亚硝酸盐氮的用途。
本发明的第三个目的是提供一种低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌株的分离培养方 法。
本发明的技术方案概述如下：
一种低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌株(Perlucidibaca piscinae)硝透CGMCC No.5281，其具有在低温好氧条件下去除污水中亚硝酸盐氮的能力。
一种低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌株(Perlucidibaca piscinae)硝透CGMCC No.5281在低温好氧条件下去除污水中亚硝酸盐氮的用途。低温优选为8-12℃。
低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌株的分离培养方法，包括如下步骤： (1)将10～20mL污水处理厂曝气池污泥接种至装有250mL硝酸细菌培养液的锥形瓶中， 所述硝酸细菌培养液中的亚硝酸钠中氮浓度为50mg/L，在8～12℃，摇床转速为120～140rpm 摇床中驯化，待亚硝酸盐氮降解率达到80～90%时，静置，去除上清液，将锥形瓶底部的污 泥接种至装有250mL第二种硝酸细菌培养液中，所述第二种硝酸细菌培养液中的亚硝酸盐氮 浓度为150mg/L，在8～12℃，在转速为120～140rpm的摇床中驯化，待亚硝酸盐氮降解率 达到80～90%时，即得到含有耐低温细菌的硝酸细菌培养液;
(2)取10mL步骤(1)获得的培养液，加入已装有90mL灭菌蒸馏水和20～30粒灭菌玻 璃珠的250mL锥形瓶中，振荡10～30min，使细菌细胞充分释放到上清液中;静置20～40min， 取1mL上清液加入装有9mL无菌蒸馏水的试管中，得到10-2的菌悬液，按上述方法依次做 系列稀释，一直做到10-8为止;
(3)选取梯度为10-5～10-8的菌悬液，分别取1mL接种于硝酸细菌固体培养基，每个稀释度 做3个平行样，编号;10℃在有氧的条件下保湿培养2～3周;
(4)从步骤(3)中的硝酸细菌固体培养基平板中挑选菌落大，形态不同的单菌落，在硝酸 细菌固体培养基平板中再次划线分离，重复平板划线分离3-4次，使平板上的菌落在显微镜 中的形态相同，单一，大小相似即为单菌落，命名为硝透，经鉴定为低温条件下去除污水中 亚硝酸盐氮的菌株(Perlucidibaca piscinae)。
所述硝酸细菌培养液由下述组分组成：NaNO2 0.25g、乙酸钠2g、MgSO47H2O 0.05g、 K2HPO4 0.2g、NaCl 0.12g、MnSO44H2O 0.01g、FeSO4 0.01g、加蒸馏水至1000m L。
所述第二种硝酸细菌培养液由下述组分组成：NaNO2 0.74g、乙酸钠2g、MgSO47H2O 0.05g、K2HPO4 0.2g、NaCl 0.12g、MnSO44H2O 0.01g、FeSO4 0.01g、加蒸馏水至1000m L。
所述硝酸细菌固体培养基由下述组分组成：NaNO2 0.5g、乙酸钠2g、MgSO47H2O 0.05g、K2HPO4 0.2g、NaCl 0.12g、MnSO44H2O 0.01g、FeSO4 0.01g、琼脂20g、加蒸馏 水至1000m L。
实验结果表明：尽管受到低温环境的明显抑制，投加本发明的一种低温条件下去除污水 中亚硝酸盐氮的菌株(Perlucidibaca piscinae)硝透CGMCC No.5281，在低温下，特别是在 8-12℃的条件下，对污水中亚硝酸盐去除有明显的强化作用，接种本发明的菌株与未接种菌 的污水进行比较，亚硝酸盐去除率提高了约为10%。
