申请日2015.09.21
公开(公告)日2016.03.02
IPC分类号C12N1/20; C02F3/34
摘要
本发明公开一种处理高浓度有机废水的菌株、微生物菌剂及其应用。具体包括戈登氏菌(Gordonia?sp.)Y-1(保藏登记号为CGMCC?NO.10791)和微杆菌(Microbacterium?sp.)Y-3(保藏登记号为CGMCC?NO.10792)，以及由戈登氏菌Y-1和微杆菌Y-3按照配比为1:1～3混合进行放大发酵，获得浓度为1×109～1×1011CFU/mL菌剂。本发明的菌株Y-1、Y-3以及微生物菌剂能维持较强的有机物的降解能力，可用于高浓度有机废水的污染物消减和降解处理领域。
权利要求书
1.一种戈登氏菌(Gordoniasp.)Y-1，其特征在于，所述的菌株保存登记号CGMCC NO.10791。
2.一种微杆菌(Microbacteriumsp.)Y-3，其特征在于，所述的菌株保藏登记号为 CGMCCNO.10792。
3.如权利要求1所述的戈登氏菌(Gordoniasp.)Y-1，其特征在于：所述菌株为革兰氏阳性，氧化酶为阴性;菌落颜色为粉红色圆形边缘整齐光滑，菌株个体成杆状状，无芽孢，能运动。
4.如权利要求2所述的微杆菌(Microbacteriumsp.)Y-3，其特征在于：所述菌株为革兰氏阳性，接触酶阳性;菌落颜色为乳白色，圆形细小边缘整齐光滑，菌株个体呈微杆状，无芽孢，能运动。
5.一种微生物菌剂，其特征在于，该微生物菌剂由戈登氏菌(Gordoniasp.)Y-1(保藏登记号为CGMCCNO.10791)和微杆菌(Microbacteriumsp.)Y-3(保藏登记号为CGMCCNO.10792按照体积比为1:1～3混合进行放大发酵，获得浓度为1× 109～1×1011CFU/mL菌剂。
6.权利要求5所述的微生物菌剂在高浓度有机废水处理中的应用。
7.权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的高浓度有机废水为化工废水、炼油或炼化废水。
8.如权利要求5所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于：将所述戈登氏菌 (Gordoniasp.)Y-1和微杆菌(Microbacteriumsp.)Y-3分别接种于BPD液体培养基、30～35℃、150～240rpm好氧条件下震荡培养1～3d至对数生长期，将获得的戈登氏菌(Gordoniasp.)Y-1和微杆菌(Microbacteriumsp.)Y-3种子液混合，配比为1:1～3;
按体积百分比1%-10%的接种量将Y-1和Y-3混合种子液移至含有放大发酵培养基的发酵罐进行发酵培养，条件为：罐温为30～37℃，罐压为0.03～0.06MPa，通气量为0.8～1.5V/V/min，搅拌速度100～300rpm、发酵时间12～24h，使发酵液中浓度为1×109～1×1011CFU/mL;获得的菌体加入常用保护剂后制备成液态菌剂，或者利用本领域的现有常规技术制成干粉状菌剂;
所述放大发酵培养基的配方为：葡萄糖15～30g/L，KH2PO45～10.5g/L， (NH4)2HPO43～6g/L，柠檬酸0.9～1.84g/L，酵母膏9.3～19.5g/L，微量元素溶液5mL，消泡剂0.1%，蒸馏水1000ml，调节pH至6.8-7.2。
说明书
一种处理高浓度有机废水的菌株、微生物菌剂及其应用
技术领域
本发明涉及一种处理高浓度有机废水的菌株、微生物菌剂及其应用，属于环境保护技术领域，也属于生物强化技术的范畴。
背景技术
生物处理是目前废水处理最常用的方法之一，具有应用范围广、适应性强及运行费用低等优点。炼油、化工等行业均产生大量高浓度有机废水，这类废水不仅含有高浓度难降解有机污染物、成分复杂且含盐量较高，这类废水回收价值不高，若采用物理化学手段处理成本很高，因此对作为首选的生化处理工艺的高效、稳定运行带来极大的难度。
传统生物处理工艺中的微生物对高浓度有机废水中的复杂的难降解污染物的降解和耐受能力不高，处理效果不理想，而且系统受冲击后恢复过程较长。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于，提供能够处理高浓度有机废水的高效菌株、由菌株制备的高效微生物菌剂，使得微生物菌剂具有活性强、抗冲击能力高和处理彻底的优点，能有效处理高浓度有机废水。
为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案予以实现：
本发明对炼油和化工行业的污水处理设施中的混合污泥样品，利用混合高浓度有机废水进行驯化培养、筛选和分离后，获得两种高效菌株。
一种高效菌株是菌株Y-1，菌株Y-1经过分子生物学鉴定为戈登氏菌属(Gordoniasp.)，该菌株已于2015-5-11日保藏在中国普通微生物菌种保藏中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏登记号为CGMCCNO.10791。该戈登氏菌Y-1菌落颜色为粉红色;圆形边缘整齐光滑，菌株个体成杆状状，无芽孢，能运动;革兰氏染色为阳性，氧化酶为阴性，能利用多种碳源。
另一种高效菌株是Y-3菌株经过分子生物学鉴定为微杆菌属(Microbacteriumsp.)，该菌株已于2015-5-11日保藏在中国普通微生物菌种保藏中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏登记号为CGMCCNO.10792。该微杆菌Y-3菌落颜色为乳白色，圆形细小边缘整齐光滑，菌株个体呈微杆状，无芽孢，能运动;革兰氏染色为阳性，接触酶阳性，能利用多种碳源。
本发明还提供了一种微生物菌剂，该微生物菌剂由戈登氏菌(Gordoniasp.)Y-1(保藏登记号为CGMCCNO.10791)和微杆菌(Microbacteriumsp.)Y-3(保藏登记号为CGMCCNO.10792)按照体积配比为1:1～3混合进行放大发酵获得的浓度为1×109～1×1011CFU/mL菌剂。
本发明还提供了上述微生物菌剂在高浓度有机废水处理中的应用，尤其在化工、炼油或炼化废水中的应用。
进一步，本发明还提供了上述微生物菌剂的一种具体制备方法，包括以下内容：
1)将所述戈登氏菌(Gordoniasp.)Y-1和微杆菌(Microbacteriumsp.)Y-3分别接种于BPD液体培养基、30～35℃、150～240rpm好氧条件下震荡培养1～3d至对数生长期，将获得的戈登氏菌(Gordoniasp.)Y-1和微杆菌(Microbacteriumsp.)Y-3种子液混合，配比为1:1～3;
2)按体积百分比1%-10%的接种量将戈登氏菌Y-1和微杆菌Y-3混合种子液移至含有放大发酵培养基的发酵罐进行发酵培养，培养条件为：罐温为30～37℃，罐压为0.03～0.06MPa，通气量为0.8～1.5V/V/min，搅拌速度100～300rpm、发酵时间12～24h，使发酵液中浓度为1×109～1×1011CFU/mL;获得的菌体加入常用保护剂后制备成液态菌剂，或者利用本领域的现有常规技术制成干粉状菌剂;
其中所述放大发酵培养基的配方为：葡萄糖15～30g/L，KH2PO45～10.5g/L，(NH4)2HPO43～6g/L，柠檬酸0.9～1.84g/L，酵母膏9.3～19.5g/L，微量元素溶液5mL，消泡剂0.1%，蒸馏水1000ml，调节pH至6.8-7.2。
本发明提供的高效菌株(戈登氏菌Y-1和微杆菌Y-3)能够处理高浓度有机废水的有机污染物。特别是由上述两种菌株复配制得的微生物菌剂，其耐受的有机负荷高、抗冲击能力强，可用于生化系统快速启动、增效处理和冲击后快速恢复，并可根据现场使用需要提供高活性液态菌剂或长期保存、便于运输的干粉状菌剂。该菌剂的制备方法具备操作简单、使用方便、成本低廉的优点，适合于规模化生产和实际工程应用，可广泛用于对炼油和化工等行业的高浓度有机废水的生物处理。
